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简介 当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后,主要抑制mRNA的翻译,可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平;也有部分表现为对标靶mRNA的降解,可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法,都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测,博贤康生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒,对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。

名称:靶基因克隆
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图一:靶基因3’ UTR sensor reporter的构建

图二: Luciferase检测原理


服务优势:

          博贤康生物技术人员使用至少三种以上的在线工具进行miRNAs靶基因的预测,并优选考虑在物种间具有高度保守特性的序列,结合博贤康技术部特有的相关细胞功能基因数据库、致病基因数据库与miRNAs功能数据库提供的参考信息,作出最为接近真实的判断。


  采用Promega公司特有psiCHECK质粒;

  所采用的Luciferase双萤光报告系统,可以获得宽泛的线性定量范围与极高 的灵敏度;

  采用瞬时转染技术,操作简便、快速,周期短,适用于绝大多数细胞类型。



服务流程:

PCR扩增靶基因的3’UTR,或直接合成结合位点序列(1-3次重复);

★ 将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒;

★ 合成miRNA 模拟物;

★ 将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞;

★ 多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。

客户提供:

miRNA与靶基因的信息,相应检测细胞株。

我们提供:

克隆有靶基因3’UTR或结合位点序列的报告质粒,检测结果与完整的实验报告。

质量保证:

正确的测序结果,阳性对照具有明确的移植效果。